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6-23
液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分,其規格有哪些呢?按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱長10~30cm;⑥生產制備柱內徑可達幾十厘米。液相色譜柱的一些注意事項:1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動溫度的突然變化...
6-18
UHPLC色譜柱特點:●高純球形硅膠填料?!窳接?.8μm和2.2μm鍵合各種官能團?!駲C械穩定性優異,可耐受壓力至10000psi?!裰行?、酸性、堿性化合物峰形美,柱效高?!裰噩F性好。UHPLC色譜柱的維護措施:1、使用保護柱2、大多數柱的PH穩定范圍是2-7.5,盡可能在此范圍內使用3、避免流動相組成及極性有劇烈變化4、流動相使用前必須經脫氣和過濾處理5、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,要在實驗完畢將柱子沖洗干凈6、壓力升高時更換保護柱
6-15
免疫親和柱的全稱為免疫親和層析柱(immnuoaffinitychromatographycolumns,IAC),常簡稱為:親和柱、免疫親和柱、親和層析柱等。它是利用抗原抗體特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原抗體的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將抗體與惰性微珠共價結合,然后裝柱,將抗原溶液過免疫親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,最后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。使用免疫親和柱凈化的優勢:因為免疫親和柱的高特異性,使用免疫親和柱凈化可...
6-8
離子色譜柱位于進樣器與分析柱之間,是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。離子色譜柱的一些常見的問題分析:1.柱壓升高在檢查流路沒有阻塞的前提下,更換離子色譜柱過濾網板,一般情況下更換保護柱進口端的網板。2.分離度降低可以是由于離子色譜柱的柱效降低或選擇改變所引起的,可以通過適合的清洗對離子色譜柱進行清洗,或者改變離子色譜的流動相來改善分離。3.死體積增大由于分離柱入口樹脂壓力使樹脂造成空隙或才樹脂壓碎而成,使離子色譜分離度...
6-7
液相色譜安全瓶蓋主要運用于溶劑瓶及廢液瓶上,前者為流動相提供了一個密封、純凈、整齊的上液環境;后者在密封的同時對廢液中的揮發氣進行收集、過濾、凈化。液相色譜安全瓶蓋安裝:1.將溶劑管穿過安全瓶蓋上的接口2.重新將溶劑入口過濾頭連接到溶劑管(開口端)3.將安全瓶蓋擰到溶劑瓶口上4.調整溶劑瓶中溶劑管的長度,然后擰緊接頭固定溶劑管這些安全瓶蓋帶有截止閥能關閉溶劑瓶。因此,維修時可以將溶劑管留在溶劑瓶中,而無需擔心溶劑會從流路中流出來。液相色譜安全瓶蓋主要特點:單向密封可以阻止揮發...
6-4
離子色譜柱是離子色譜系統的心臟,只有性能優良的色譜柱才能達到良好的分離效果,這對色譜柱材料,填充料(交換樹脂)、柱尺寸、裝柱技術等均有一定的要求。柱兩端均有微孔篩板以防試料或洗脫液中的細微顆粒進入柱中,影響柱中樹脂的滲透性。離子色譜柱的分離原理:使用表面有離子交換基團的離子交換劑作為固定相。帶負電荷的交換基團(如磺酸基和羧酸基)可以用于陽離子的分離;帶正電荷的交換基團(如季胺鹽)可以用于陰離子的分離。不同離子與交換基的作用力大小不同,在樹脂中的保留時間長短不同,從而被相互分離...
5-28
色譜柱基本上是每個實驗室的一種實驗室耗材,當使用效果已經無法滿足實驗需求的時候,就需要考慮更換新的色譜柱了。那么如何判斷更換新色譜柱的時間呢?(1)使用壓力、分離度和峰形的混合指標來考察一根色譜柱的狀態。壓力的測量是最容易的,通常我們確定的色譜方法要滿足以下的要求:用新柱子時柱壓不高于2500psi,在任何情況下壓力都不超過3000psi。有統計表明,超過60%的色譜柱損壞是由于壓力過高的原因。分離度是考察色譜柱的一個非常重要的指標,只要兩個組分可以獲得基線分離,對該分析物的...
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